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Thermo Fisher Scientific (China) Co., Ltd
Collection de schémas CAD | nouveau détecteur électronébuleux Seamless join pharmacopoeia Variety
Date :2025-11-05Lire :0
Dès le lancement de la septième génération de détecteurs électro - buée Vanquish CAD série P, l'industrie s'est beaucoup intéressée à ces détecteurs. Deux questions centrales: peut - on revenir à optimiser une partie des variétés de pharmacopée? Les méthodes CAD existantes peuvent - elles être transférées en toute transparence? Une réponse pour vous!
1. Macromycine
La spectinomycine (antibiotique aminocyclol dérivé de Streptomyces) n'a pas de structure conjuguée, une faible absorption des UV et ne peut pas être analysée de manière conventionnelle avec un détecteur UV. Le détecteur Cao de type universel, avec une haute sensibilité et une reproductibilité stable, est devenu le premier choix pour ce type de détection antibiotique.
1.1 instruments
Thermo Scientific ™ Vanquish ™ Système de chromatographie HPLC Vanquish Core:
Base du système:Noyau de Vanquish (VC-S01-A-02)
La pompe:Pompe quaternaire CN (VC-P21-A-01)
échantillonneur automatique:Échantillonneur séparé C (VC-A13-A-02)
Incubateur de colonne:Compartiment de colonne C (VC-C10-A-03)
Le détecteur:Vanquish Horizon CAD P(VH-D21-A-01)
Logiciel:Chromeleon™ 7.3 CDS
1.2 conditions chromatographiques
Colonne chromatographique:Acclaim AmG C18, 3,0 x 150 mm, 3 µm (P/N : 088755)
Phase fluide:Solution aqueuse d'acide trifluoroacétique à 0,1 mol / L, élution isocratique
Débit:0,4 mL/min
Température de la colonne:25℃
Quantité d'échantillon:5 μL
Détecteur CAD:Température d'évaporation: 35°c, fréquence d'acquisition: 5 Hz, constante de filtration: 3,6 s
1.3 résultats expérimentaux
Figure 1 carte de détermination de la spectinomycine dans l'échantillon
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Figure 2 carte des limites quantitatives de la spectinomycine
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Figure 3 Résultats de précision de la spectinomycine
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Figure 4 Résultats linéaires de la spectinomycine (1 - 20 ppm)
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La colonne acclaim AMG C18 de symerfly (technologie d'enveloppe polymère) résiste de manière stable à l'hydrolyse dans un environnement fortement acide et hautement aqueux, adapté aux conditions de chromatographie d'une solution aqueuse d'acide trifluoroacétique à 0,1 mol / L. Le test a montré: le pic principal de la spectinomycine et les substances connexes ont été détectés complètement et bien séparés; La limite de quantification est de 5 ng (1,0 ppm, S / n = 11,7, 5 µl d'échantillon), 6 répétitions d'échantillon RSD (temps de rétention 0,06%, surface du pic 0,87%) et 1 - 20 ppm r² linéaire > 0999 (PV = 1,5). La méthode est très sensible, haute densité de finition, bonne linéarité, répond parfaitement aux besoins de détection de chlorhydrate de spectinomycine.
1.4 résultats et discussion
La valeur de la réponse du détecteur de diffusion de la lumière évaporée est en relation exponentielle avec la qualité du mesurage, nécessitant une conversion logarithmique; La valeur de réponse du détecteur Cao avec le nombre de masses est non linéaire, nécessite une conversion logarithmique ou un calcul de fonction quadratique, et une petite plage (par exemple, la spectinomycine 1 - 20 ppm) peut être linéaire primaire. Certains scénarios nécessitent une large plage de concentration pour examiner la linéarité une fois, en combinaison avec la cohérence de la réponse Cao, pour obtenir des informations précises sur la pureté des composants principaux de l'échantillon.
Figure 5 Résultats linéaires pour différentes valeurs de PV (valeurs de PV dans l'ordre: 1,5, 1,8, 2,0, 2,2) (cliquez pour agrandir l'image)
Figure 6 acquisition simultanée de différentes valeurs de PV par quatre canaux
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La nouvelle fonction d'optimisation de la valeur PV pratique du détecteur de la série CAD P élargit la plage linéaire primaire et réduit l'écart des résultats. Cas de la spectinomycine: à des concentrations de 1 à 200 ppm, 4 essais de PV (1,5 / 1,8 / 2,0 / 2,2) ont montré que seul PV = 2,0 pouvait être ajusté linéairement une fois (r² > 0999), le reste étant une fonction quadratique; PV = 2,2 Optimum linéaire primaire à 1 - 600 ppm. L'application pratique peut choisir la valeur optimale de PV par gamme de concentration, pour compléter efficacement la détermination du contenu. Le nouveau test de la série CAD P peut définir 4 valeurs PV simultanément, ce qui réduit le temps de dépistage et améliore l'efficacité du développement de la méthode.
Figure 7 CAD avec vanne de commutation de série
Figure 8 Profil de l'échantillon de spectinomycine après commutation de la vanne de réglage (cliquez pour l'agrandir)
Détecteur CAD série P 3 sélections 1 vanne de commutation pour un réglage plus flexible à la demande. Comme dans la figure: 1.6-2.6min Valve Cut, couper la matrice indépendante à la liqueur de déchets, conserver le chlorhydrate de spectinomycine et les impuretés, réduire la pollution, améliorer la durabilité de l'instrument, réduire les coûts de maintenance. Lorsque le détecteur est vide / mal noté, la vanne est coupée à la liqueur / dérivation des déchets, ce qui évite l'inondation du détecteur et garantit la sécurité de l'instrument.
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2. Acide désoxycholique
Du statut standard à l'application sur le marché, l'acide désoxycholique forme une adaptation stable avec le détecteur CAD: l'un d'eux, en tant que variété de contrôle standard CAD, l'acide désoxycholique a été inclus et utilisé par l'USP depuis de nombreuses années, est l'étalon - or de son contenu et de la détection des impuretés; Deuxièmement, avec l'autorité standard et l'adaptation du test, de plus en plus de clients utilisent actuellement des détecteurs CAD pour effectuer des tests d'acide désoxycholique.
2.1 instruments
Thermo Scientific ™ Vanquish ™ Système de chromatographie uhplc Flex:
Base du système:Vanquish Horizon/Flex (VF-S01-A-02)
La pompe:Pompe quaternaire Vanquish F (VF-P20-A)
échantillonneur automatique:Vanquish Split échantillonneur FT (VF-A10-A-02)
Incubateur de colonne:Compartiment de colonne Vanquish H (VH-C10-A-03)
Le détecteur:Détecteur d'aérosol chargé Vanquish HP (VH-D21-A-01)
Détecteur d'aérosol chargé Vanquish H (VH-D20-A)
Logiciel:Chromeleon™ 7.3.2 CDS
2.2 Conditions chromatographiques
Colonne chromatographique:Acclaim™ 120 C18 3µm,4,6 × 150 mm (P/N 059133)
Phase fluide:A: acide formique aqueux à 0,1%, B: acétonitrile formique à 0,1%, élution graduée voir tableau 1
Tableau 1 procédure d'élution en gradient
Débit:1.0mL/min
Température de la colonne:30 ℃, mode de circulation d'air (vitesse du ventilateur 5), préchauffage actif
Quantité d'échantillon:25μL ， Température de l'échantillonneur: 8℃
Valeur PFv pour Vanquish CAD H: 1.0, 1.2, 1.4, 1.6
Valeurs PV pour Vanquish CAD HP:
Paramètres communs CAD:Température d'évaporation: 50°C, fréquence d'acquisition: 20 Hz, constante de filtration: 2, 3,6, 5, 10 s
2.3 résultats expérimentaux
Paramètres de base du détecteur CAD: valeur PV (valeur PFv originale), température d'évaporation, constante de filtration. Le transfert de Vanquish CAD H vers Vanquish CAD HP nécessite d'examiner l'ajustement de ces paramètres. Résultat: température d'évaporation 50 ℃, les deux répondent à S / N; Constante de filtration 5S, les deux combinent bruit et largeur de crête. Remarque: les valeurs PFv des deux diffèrent fortement des valeurs PV et doivent être vérifiées.
Figure 9 CAD HP désoxycholic Acid résultats pour différentes valeurs de PV linéaires et résiduelles
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Figure 10 CAD h désoxycholic Acid résultats pour différentes valeurs PFv linéaires et résiduelles
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Pour comparer la performance linéaire de l'acide désoxycholique, les valeurs PFv de Vanquish CAD H ont été fixées à 1,0, 1,2, 1,4, 1,6 et les valeurs PV de Vanquish CAD HP ont été fixées simultanément à 1,5, 1,8, 2,1, 2,4, examinant la relation linéaire dans la gamme de concentrations de 0,5 à 10 μg / ml. Les résultats expérimentaux montrent que: Vanquish CAD H (PFv = 1,2), Vanquish CAD HP (PV = 1,8) donnent les meilleurs résultats linéaires primaires, R²=1.00； Et les deux résidus ont été répartis aléatoirement autour de la ligne zéro (y = 0), ce qui a vérifié la validité de l'ajustement du modèle linéaire sélectionné.
Figure 11 chromatographie CAD de l'acide désoxycholique et résultats d'adaptation du système (n = 10) (cliquez pour l'agrandir)
Résultats d'aptitude au système: DSR < 3,0% de la surface du pic pour les deux détecteurs CAD à 0,01 mg / ml d'acide désoxycholique; À 00005 mg / ML, S / n est > 10 et la sensibilité est atteinte. Les deux répondent aux exigences de la méthode USP pour la détermination de l'acide désoxycholique.
2.4 résultats et discussion
Figure 12 transfert sans couture sous le mode Legacy (cliquez pour l'agrandir)
De la fonction mode au transfert de méthode, la série Vanquish CAD P forme une solution complète: ① sélection de mode: Easy (PV à canal unique), Advanced (filtrage efficace à 4 canaux), Legacy (ancienne conversion automatique PFv); ② logique de conversion: PFv × 1,5 = nouveau PV, cas d'acide désoxycholique (1,2 → 1,8) coïncidant avec les données expérimentales; ③ valeur de base: les anciens paramètres sont convertis en toute sécurité, le transfert de méthode est pratique et efficace, réduisant les coûts d'exploitation.
Résumé
Vanquish CAD P détecteur électronébuleux pour la version 2025 de la pharmacopée chinoise de la scène de détection du chlorhydrate de spectinomycine, la précision du point douloureux central du détecteur de diffusion de la lumière évaporée (ELSD) est faible sensibilité, mauvaise répétabilité, une touche pour obtenir une linéarité plus large, la déviation du résultat est minime, améliore considérablement l'applicabilité de la méthode pharmacopée, la vanne de commutation reste durable. La méthode USP d'acide désoxycholique est facilement transférée, sans souci pour les clients!
Références:
[1] deuxième édition 2020 de la pharmacopée chinoise chlorhydrate de spectinomycine
[2] an - 25052 - chromatographie liquide haute performance HPLC - Etude de la méthode de détection de la spectinomycine par détecteur électronébuleux
[3] Pharmacopée des États-Unis [M]. Convention Phar macopeial des États-Unis, 2016.
[4] TN_3816 Transfert de méthode et optimisation de l'analyse de l'acide déoxycholique par HPLC-CAD