L'étude a été réalisée par le Département de biologie buccodentaire dentaire de l'Université des sciences de la santé d'HokkaidoTakeharu NiiokaTeam publié dans «Archives de la biologie oraleLe journal. L'étude se concentre sur les morsures musculaires de rat et s'articule autour de trois questions: (1) Si les nerfs parasympathiques qui innervent les vaisseaux sanguins ont des peptides intestinaux vasoactives (VIP), immunoréactivité; （2) injection intraveineuseVIPSi la vasodilatation est induite; （3), en présence ou en l'absence d'atropine, la sélectivitéVIPAntagonistes des récepteurs[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEffet sur la vasodilatation parasympathique.

Résumé

Les fibres vasodilatatrices parasympathiques sont connues pour dominer les vaisseaux sanguins du muscle mordant du rat par deux mécanismes cholinergiques et non cholinergiques, mais les mécanismes non cholinergiques sont inconnus. Ces dernières années, les Peptides intestinaux vasoactifs (VIP), il a été démontré qu'il est impliqué dans le processus de vasodilatation parasympathique de la cavité buccale et maxillo - faciale (les glandes sous - maxillaires et la lèvre inférieure ci - dessous), mais les études pertinentes sur les muscles mordants chez le rat sont extrêmement limitées. Cette étude a porté sur le muscle mordant du rat et visait à évaluer: (1), si les nerfs parasympathiques qui innervent les vaisseaux sanguins ontVIPImmunoréactivité; （2) injection intraveineuseVIPSi la vasodilatation est induite; （3), en présence ou en l'absence d'atropine, la sélectivitéVIPAntagonistes des récepteurs[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEffet sur la vasodilatation parasympathique. L'étude a révélé que dans le ganglion de l'oreille parasympathique (Le Dieu originel), ainsi que des fibres nerveuses autour des vaisseaux sanguins, détectés dans les deux sitesVIPImmunoréactivité. Injection intraveineuseVIPPeut induire une vasodilatation, tandis que[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPPeut diminuerVIPEffet vasodilatateur induit par l'injection. Utilisé seul[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPIncapacité à inhiber la vasodilatation parasympathique, mais lorsque[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPLorsqu'il est utilisé en association avec l'atropine, la vasodilatation parasympathique peut être atténuée. Ces résultats montrent que: (1), présent dans le nerf parasympathique post - ganglionnaire qui innerve les vaisseaux musculaires mordusVIP; (2) injection intraveineuseVIPPeut induire une vasodilatation du muscle mordant; （3), lorsque les récepteurs muscariniques cholinergiques sont bloqués par l'atropine ou l'acétylcholine (ACh), lorsque la libération est inhibée et inactivée,VIPPeut être impliqué dans le processus de vasodilatation parasympathique des muscles mordus.

ExpérimentationsMatériaux et instruments

I) matériel expérimental

1. Animaux de laboratoire: mâles adultesWistarRats;

2. Traceurs et réactifs:2%Or fluorescent, sérum physiologique stérile,VIP, sélectivitéVIPAntagonistes des récepteurs[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIP, atropine, urantan, bromure de pancuronium;

3. Anticorps et réactifs liés à la coloration:VIPAnticorps, anticorps transporteur vésiculaire d'acétylcholine,Alexa-488Marquer âne anti lapinIgGAnticorps,Alexa-568Marquer âne contre chèvreIgGAnticorps, fluorescéine marquée ricine lectineJe、1%Sérum d'âne non immunisé,0,3%Traratonele X-100、0,3%Sérum albumine bovine,4%Paraformaldéhyde,0,1 MTampon d'acide phosphorique,30%Sucre de canne;

Ii) Instruments expérimentaux

4. OmegawaveFLO-C1 Débitmètre laser Doppler、Microscope à fluorescence、Microscope à balayage laser confocal、Trancheuse congeléeEt,HamiltonMicroinjecteurs、Tapis chauffants、Ventilateur artificiel、Cathéters (pour l'intubation fémorale et artérielle fémorale)

OmegawaveFLO-C1Débitmètre laser Doppler

Processus expérimental

1. Élevage d'animaux et approbation éthique

2. Expérience de double Marquage fluorescent

3. Coloration immunohistochimique

4. Mesure du débit sanguin musculaire: couper les nerfs vagaux cervicaux bilatéraux et la tige sympathique supérieure cervicale avant l'expérience pour exclure les effets des nerfs vagaux et sympathiques. Induire une vasodilatation réflexe du nerf parasympathique musculaire mordant par stimulation électrique de l'extrémité coupée du nerf lingual central gauche, avecOmegawaveFLO-C1 Débitmètre laser DopplerSurveiller et enregistrer le flux sanguin musculaire mordant (MBF), le changement. Différentes doses intraveineuses séparémentVIP, ObservationMBFChangements; Dans l'injection100ng/kg VIPdevant20Minutes, perfusion continue[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPObserver sa paireVIPInduiteMBFEffets élevés. En outre, respectivement après administration intraveineuse d'atropine, perfusion continue[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPLorsque, et lorsque les deux sont utilisés en combinaison, la stimulation électrique des nerfs de la langue, l'enregistrementMBFVariable, les résultats sont exprimés en pourcentage de la réponse témoin pré - médicamenteuse.

OmegawaveFLO-C1Débitmètre laser Doppler

(Un) nerfs de la langue (LN), stimulation électrique (contrôle) et administration intraveineuse de peptides intestinaux vasoactifs (VIPLes doses sont respectivement1、10 et100 ng/kg) débit sanguin moyen induit (MBF), un exemple typique d'augmentation.

b)Injection résumée 0(saumure physiologique uniquement),1、10 et100 ng/kg VIPPost - induiteMBFSituation accrue (n = 4). Données àLNLe pourcentage de réponses témoins induites par stimulation électrique est exprimé.

c)(C) dans la sélectivitéVIPAntagonistes des récepteurs ([4 -Chlore- D -Phénylalanine ⁶,Leucine ¹⁷]Peptides intestinaux vasoactifs,[4Cl-D-Phe]⁶, Leu¹⁷[VIP]), en présence et en absence, Injection100 ng/kg VIPInduiteMBFExemple typique d'augmentation.

D)(D) et[4Cl-D-Phe]⁶, Leu¹⁷[VIP]contre100 ng/kg VIPInduite par injectionMBFEffet accru exprimé en pourcentage de la réaction de prétraitement (n = 5).

5. Analyse statistique

Conclusion de l'expérimentation

1. Présence dans le nerf parasympathique post - ganglionnaire innervant les vaisseaux sanguins du muscle mordant du ratVIPImmunoréactivité, etVIPAvecVAChT(marqueur cholinergique) dans les ganglions de l'oreilleFGPrésence de co - localisation sur les neurones marqués ainsi que sur les fibres nerveuses entourant les vaisseaux musculaires mordus;

2. Injection intraveineuseVIPInduction de vasodilatation musculaire mordante chez le rat d'une manière dose - dépendante et sans effet sur la pression artérielle systémique, sélectiveVIPAntagonistes des récepteurs[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPPeut être inhibéVIPCet effet vasodilatateur induit, indiquantVIPEn activant la paroi vasculaire du muscle mordantVIPLes récepteurs jouent un rôle;

3. Utilisé seul[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPAucun effet sur la vasodilatation parasympathique du muscle mordant induite par stimulation du nerf lingual, cet effet vasodilatateur pouvant être partiellement atténué par Atropine seule; Et quand[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPEn association avec l'atropine, cet effet vasodilatateur peut être inhibé, suggérant que lorsque les récepteurs muscariniques sont bloqués par l'atropine ou que la libération d'acétylcholine est inhibée,VIPParticipe à la régulation vasodilatatrice parasympathique des muscles mordus.