1) besoins nutritionnels

· acides aminés - 12 acides aminés essentiels (valine, leucine, isoleucine, thréonine, lysine, tryptophane, phénylalanine, Méthionine, Histidine, tyrosine, Arginine, cystéine); 10 acides aminés non essentiels; Il existe également un besoin pour la Glutamine, qui joue un rôle important dans le métabolisme cellulaire, et l'azote contenu est la source de la synthèse des purines et des pyrimidines dans les acides nucléiques, ainsi que la substance essentielle nécessaire à la synthèse des glycosides tri -, di -, monophosphate.

· glucides - sucres - Glucose; Galactose; La capacité d'absorption du glucose par les cellules est la plus élevée et le Galactose est faible.

• sels inorganiques - Sodium, potassium, magnésium, phosphore, calcium, etc.;

• vitamines - biotine, acide folique, riboflavine, vitamine C, vitamine B12, Pyridoxine, etc.;

• protéines et Peptides - albumine, antipeptidase, foetoglobuline, fibronectine, transferrine, facteurs de croissance;

• acides gras et lipides - acide linoléique, acide oléique, cholestérol, etc.;

• oligo - éléments - fer, zinc, sélénium, cuivre, manganèse, molybdène, vanadium, etc.

(2) température

La température couramment utilisée est de 37 °, mais il faut faire attention à différentes cellules tissulaires d'origine biologique, la température de culture la plus appropriée est différente et les cellules sont résistantes aux basses températures et ne tolèrent pas les températures élevées. Dans la plage de température physiologique, la température est positivement corrélée avec le taux de croissance cellulaire.

(3) pression osmotique

La taille de l'osmolarité est principalement déterminée par la concentration des différents composants salins dans le milieu de culture. Les cellules doivent vivre dans un environnement isotonique avec leurs propres protoplastes, si la pression osmotique de l'environnement de survie est supérieure à elle - même, les cellules cultivées risquent de mourir face à la déshydratation, si la pression osmotique de l'environnement de survie est inférieure à elle - même, les cellules cultivées risquent de mourir face à L'absorption d'eau, mais la plupart des cellules cultivées ont une certaine tolérance à la pression osmotique. L'osmolalité plasmatique humaine de 290 mosm / kg peut être considérée comme l'osmolalité idéale pour la culture de cellules humaines. L'osmolalité cellulaire Murine est d'environ 320 mosm / kg. Pour la culture de la plupart des cellules de mammifères, il convient de contrôler l'osmolalité du milieu de culture dans la gamme 260 - 320 mosm / kg.

(4) phase gazeuse

L'environnement en phase gazeuse des cultures cellulaires in vitro est généralement constitué de 5% de CO2 pour 95% d'air. O2 est impliqué dans les processus métaboliques énergétiques des cellules. Le CO2 est utilisé pour maintenir l'acidité et l'alcalinité du liquide de culture.

(5) pH

Le milieu approprié pour la croissance de la plupart des cellules a un pH compris entre 7,0 et 7,4 et un environnement de pH 7,4 convient à la plupart des lignées cellulaires de mammifères. Le rouge de phénol est utilisé dans le milieu de culture comme indicateur du pH pour surveiller en permanence l'acidité et l'alcalinité du liquide de culture, le rouge de phénol donne une couleur jaune au pH bas, tandis que le pH plus élevé donne une couleur violette au liquide de culture et une couleur rouge au pH 7,2 - 7,4, ce qui convient à la culture cellulaire.

(6) Non toxique et sans pollution

La non - toxicité et la stérilité sont des conditions préalables à la culture de cellules in vitro. Dans le système de désintoxication des cellules du corps vivant et le système immunitaire, il peut résister à l'invasion de micro - organismes ou d'autres substances nocives, mais les cellules en culture in vitro manquent de protection du système immunitaire de l'organisme, ce qui entraîne la perte de la défense contre les micro - organismes et la capacité de désintoxication contre les substances nocives. La garantie d'un environnement de croissance des cellules non toxique et non pollué est donc la première condition du succès de la culture cellulaire. Dans le processus de culture cellulaire, veillez à prévenir la contamination par des produits chimiques toxiques, la contamination microbienne, la contamination croisée entre différentes cellules.