Principe d'action du système tampon HEPES de qualité injectable sur le buffer comme ARNm

Le buffer utilisé dans le liquide brut d'ARNm dans l'article de biontech 2016 sur la formulation d'ARNm lpx est HEPES. Dans cette étude, un tampon HEPES a été utilisé pour configurer 1 mg / ml d'ARN brut pour la préparation ultérieure de l'ARN - lpx.

HEPES présente des avantages en tant que buffer de système réactif IVT, ce qui est la raison pour laquelle nous avons combiné la littérature pertinente pour inférer que biontech a adopté la paire de tampon HEPES en tant que buffer de plasma d'ARNm.

Caractéristiques de HEPES par rapport aux autres systèmes tampons

Le PKA varie très peu avec la température et le pH du buffer dérive très peu avec la température.

2, la nature est stable, HEPES n'interagit pas avec d'autres ions, d'une part HEPES ne se complexe pas avec d'autres ions affecte d'autres fonctions ioniques, d'autre part, la présence d'autres ions n'affecte pas la capacité tampon de HEPES.

3, le maintien du pH dans le milieu de culture cellulaire repose principalement sur le bicarbonate dans le milieu de culture et 5% de CO2 co - maintenu, lorsque les cellules sont dans un environnement ouvert, l'échappement de CO2 provoque une augmentation rapide du pH hors de la gamme de pH physiologique, et le milieu de culture avec L'ajout de paires tampons HEPES n'a pas ce problème.

4, HEPES n'est pas facile à traverser le biofilm et n'interfère pas avec les réactions biochimiques à l'intérieur des cellules.

Iv. Précautions lors de l'utilisation du système tampon HEPES

En raison de la présence du Groupe paizine, lorsque HEPES est exposé à la lumière, il produit H2O2, qui est toxique pour les cellules en culture ou d'autres objets biologiquement actifs, tandis que les substances sensibles à l'oxydoréduction ne sont pas appropriées pour une utilisation conjointe, de sorte que l'opération HEPES comme tampon doit être effectuée Dans des conditions d'isolation de la lumière autant que possible.

2, HEPES dans le domaine biochimique est couramment utilisé à une concentration de 10 - 25 mm, lorsque la concentration est inférieure à 10 mm, la capacité tampon est faible, ne peut pas jouer un meilleur effet tampon, lorsque la concentration est plus élevée sur certaines cellules peut avoir un effet toxique.

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