Cy3 NHS EsterCy3-N-Ester d'hydroxysuccinimide

Informations sur le produit:

Nom du produit	spécification	Stockage	Prix (En dollars)
Ester Cy3 - N - hydroxysuccinimide du NHS	10 mg	- 20 ℃ Conservation sèche à l'abri de la lumière	2050.00

Fournisseurs:Xi'an Kai nouvelle biotechnologie a Ltd

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Description du produit

Cyanine 3（Cy3）， Est l'un des membres de la famille des colorants anthocyane - fluorescéine et est un colorant polyméthylène synthétisé chimiquement. La gamme actuelle de colorants cyanine est disponible sous la forme de deux isomères, les cyanines non sulfonées et les cyanines sulfonées. Les propriétés spectrales des deux sont presque identiques, de sorte que la plupart des applications peuvent être remplacées l'une par l'autre, par exemple pour marquer des molécules biologiques telles que l'ADN ou les protéines. Les principales différences entre les deux sont les suivantes: les colorants sulfonés sont solubles dans l'eau, il n'est pas nécessaire d'utiliser des co - solvants organiques dans le système réactionnel de marquage de la phase aqueuse, et la possibilité d'agrégation des colorants dans l'eau est réduite et l'efficacité du marquage est améliorée.

Cette cyanine 3 (Cy3) est fournie sous forme de colorant sulfoné, facilement soluble dans l'eau, Ex=555 nm，Em=565nm， Avec les avantages de la fluorescence brillante, de la forte stabilité à la lumière et de la non - sensibilité au pH, il convient au marquage des Polypeptides, des protéines ainsi que des molécules biologiques telles que les acides nucléiques pour analyser la protéine d'intérêt par imagerie fluorescente ultérieure ainsi que d'autres méthodes biologiques de fluorescence.

Cet Ester Cy3 NHS, c'est - à - dire Cy3 contenant un groupe activé n - hydroxysuccinimide (n - hydroxysuccinimide), peut être directement associé à un groupe amino (- NH) sur une molécule biochimique.₂), la réaction forme des liaisons Amides stables, principalement des Amines primaires.

Nature du produit

Alias anglais (Anglais Synonyme) et	Cyanine 3, ester monosuccinimidylique
Poids moléculaire (Poids moléculaire) et	829.03
Apparence (Apparence) et	Solide violet
Ex/Em	555nm / 565nm
Solubilité (Solubilité) et	Soluble dans DMSO, DMF, eau
Structure (Structure) et

Méthodes de transport et de conservation

Transport de sacs de glace. - 20 ℃ sec et protégé de la lumière, valable 1 an.

Précautions

1) le NHS Ester Group est très sensible à l'humidité, assurez - vous de sécher et de conserver le produit. Le produit doit être ramené à température ambiante pendant au moins 20 minutes avant utilisation.

2) l'hydrolyse du Groupe Ester NHS se produit lorsque le système tampon hydrosoluble appartient à une réaction compétitive. La réaction de ligation sur l'amine primaire protéine / polypeptide (concentration: 1 - 1 mg / ML) est recommandée dans la gamme de pH 7 - 9. L'utilisation d'un système tampon sans Groupe Amino, pH 7-9。 Par exemple, 100 mm de phosphate de sodium, 150 mm de chlorure de sodium, pH 7,5; 100mM Hepes, pH 7.5。 100 mm de carbonate de sodium / bicarbonate de sodium, pH 8 - 9; Ou un tampon acide borique 100 mm, pH 8 - 9.

3) n'utilisez aucun tampon contenant des Amines primaires, comme Tris, Glycine.

4) pour votre sécurité et votre santé, Veuillez porter des vêtements expérimentaux et utiliser des gants jetables.

Méthode d'utilisation (avecEster du Cy3-NHSAnticorps marqués)

【Attention]: il peut être fait référence à cette méthode pour le marquage des Polypeptides, des protéines ou d'autres molécules, nécessitant des ajustements appropriés en fonction du système expérimental spécifique pour le système tampon de marquage approprié, la concentration de l'échantillon, la concentration de colorant et d'autres paramètres.

1) lyser l'anticorps avec un tampon approprié ne contenant pas d'amino (ex. phosphate de sodium 100 mm, NaCl 150 mm, pH 7,5) pour atteindre une concentration de 1 à 5 mg / ML. 【Note: en cas de contamination résiduelle par tris ou glycine dans les anticorps, il est nécessaire de dialyser ou de dessaler dans un tampon approprié.

2) avant utilisation, dissoudre le Cy3 - NHS avec une quantité appropriée d'eau désionisée ou de DMSO anhydre de sorte que sa Concentration molaire soit 400 fois celle de l'anticorps, par exemple, la concentration d'IgG à marquer est de 1 mg / ML (eg 6,7 µm), puis la concentration de Cy3 - NHS après dissolution est de 2,7 mm; si la concentration d'IgG à marquer est de 2,5 mg / ML, la concentration de Cy3 - NHS après dissolution est de 6,75 mm;

3) Ajouter la bonne quantité de réactif Cy3 - NHS à l'anticorps pour atteindre l'efficacité de marquage souhaitée. 【Note]: lors de l'étiquetage des anticorps ou d'autres protéines avec CY 3 NHS ester, la luminosité est élevée pour les coupleurs dont le rapport colorant / protéine est de 4 à 12, en fonction de l'application spécifique. Un taux trop élevé augmente le fond non spécifique, la perte de la liaison spécifique de l'anticorps, conduisant à l'agrégation. Il est recommandé d'optimiser le ratio de marquage en fonction de l'application.

4) incuber à température ambiante pendant 60 min (ou plus);

5) Utiliser une colonne de dialyse ou de dessalement avec un tampon approprié pour éliminer les réactifs qui n'ont pas réagi;

6) Détection des valeurs d'absorption lumineuse des anticorps Cy3 - respectivement à 280 nm et 550 nm;

7) Détermination de l'efficacité de marquage Cy3 (dol) et de la concentration de marquage. Voir la formule ci - dessous.