2025an10Mois, laboratoire de pharmacologie vétérinaire de l'Université du Massachusetts, etcBiomédicamentsUne étude a été publiée dans la revue. L'étude a porté sur Lactobacillus paracasei (Lactobacillus paracasei), cultures microbiennes mixtes de Pichia membranaire et Saccharomyces cerevisiae (LS), pour les nouveaux probiotiques, a exploré l'utilisation externeLSDermatite atopique (AD), les effets thérapeutiques et prophylactiques du modèle murin et son mécanisme immunomodulateur ont été étudiés par des expériences in vitro.

Résumé

Contexte/Le but

Cette étude porte sur des cultures microbiennes mixtes de Lactobacillus paracasei, Pichia membranosum et Saccharomyces cerevisiae (LS), ce nouveau probiotique, conçu pour explorer l'usage externeLSDermatite atopique (AD), effets thérapeutiques et prophylactiques sur des modèles murins.

La méthode

Par détection d'interleukine (IL) et-10Et facteur de nécrose tumorale (TNF) etαNiveau, dans la lignée cellulaire dendritique de souris (DC2.4) dans l'étudeLSEffet immunomodulateur; Par l'attentionIL-8Et chimiokines régulatrices activées par le thymus (Le tarc), la production de kératinocytes épidermiques humains stimulés (Hachan) évalué dansLSEffet anti - inflammatoire; Enfin, établi par sensibilisation locale à la pommade d'acariens de la poussièreADModèle de souris, examen10 % LSEffets thérapeutiques et préventifs à usage externe. Surveillance hebdomadaire des signes cliniques, de l'épaisseur de la peau du dos et de la perte d'eau transépidermique (TEWL), la réponse immunitaire des ganglions lymphatiques derrière l'oreille est analysée après autopsie.

résultat

LSAmélioration du traitementDC2.4Sécrétion cellulaireIL-10etTNFα; etLSAprès co - culture, stimuléeHachanProduite par les cellulesIL-8etLe tarcRéduit. DansADModèle de souris dans le cadre du traitement, bien que les symptômes cliniques, l'épaisseur de la peau etTEWLRienClairementChangement, maisLSGroupe de traitement dans les ganglions lymphatiques locauxIgEPositifC. BLe nombre de cellules etIL-4Niveau réduit; AvecADComparativement aux souris témoins,LSLe traitement préventif réduitADLes symptômes.

conclusion

Les résultats de l'étude montrent que,LSEffets immunomodulateurs et anti - inflammatoires évitablesADDéveloppement de l'occurrence.

ExpérimentationsMatériaux etInstruments

1. Matériel expérimental

Cultures microbiennes mixtes (LS) et

Lignées cellulaires: lignée de cellules dendritiques de souris, lignée de kératinocytes épidermiques humains

Animaux de laboratoire:NC/RussieSouris

Réactifs:10%Sérum de veau foetal, pénicilline-Streptomycine, humaine recombinanteTNFαInterféron (IFN) etγDétermination immuno - enzymatique (ELISA), kits, anticorps monoclonaux (PE/Cyanine7Anti - souris coupléesCD3Et,PEAnti - souris coupléesCD4Etc. sourisTActivateurCD3/CD28Perles magnétiques,Biostir AD(extrait d'acariens de la poussière),4%Solution de Laurylsulfate de sodium

2. Instruments expérimentaux

CellDrop™Système de comptage cellulaire

BD FACSAria™ IIITrieur de cellules

ASCH VAPOSCANAppareil de mesure de la perte d'eau percutanée

Processus expérimental

1. Expérimentation in vitro

•DC2.4Expérimentation cellulaire: sera70%CombinéDC2.4Les cellules (1×10 ⁴Une cellule/ 100 μL) inoculé à96Plaque de culture de puits, exposée à différentes concentrations deLS, parELISADétection quantitative dans le surnageantIL-10etTNFαLa concentration.

•HachanExpérimentation cellulaire: sera70%CombinéHachanLes cellules (1×10 ⁴Cellules) inoculées à contenir100 μLDu milieu de culture96Plaque de culture de puits, avec Recombinant humainTNFαetInterféron gammaStimulation1Après les heures, rejoignez100 μLDifférentes concentrations deLS, incubation24Heures, parELISADétection quantitative dans le surnageantIL-8etLe tarcLa concentration.

2. Expérimentation in vivo

•ADÉtablissement du modèle murin: par sensibilisation localeBiostir AD(extrait d'acariens de poussière) et appliqué localement4%Solution de Laurylsulfate de sodium, enNC/RussieÉtablissement chez la sourisADLe modèle.

•Schéma posologique: Groupe de traitement à partir deADAprès l'apparition de la maladie19Jours (moyenneADLe score est2.07) à la33Jour, application topique quotidienne0,1 mL/seulement10 % LSLa solution (n = 8), ou le milieu aqueux distillé (n = 7); Groupe de prévention à partir de0Du jour au jour18Les jours (ADAvant induction) pour une administration locale.

•Suivi des indicateurs: suivi hebdomadaire pendant l'expérienceTEWL, épaisseur de la peau du dos et score clinique (0 - 4Fractions, correspondant à asymptomatique, léger, modéré, sévère, extrêmement sévère, respectivement).

ASCH VAPOSCANAppareil de mesure de la perte d'eau percutanée

•Collecte et analyse des échantillons: après sensibilisation1Jour, recueillir les ganglions lymphatiques derrière l'oreille de souris (LN), préparer une suspension unicellulaire et la compter; ParBD FACSAria™ IIIUn trieur cellulaire analyse le phénotype cellulaire; Mettre la suspension unicellulaire des ganglions lymphatiques (5×10 ⁵Une cellule/Trou) avec la sourisTActivateurCD3/CD28Incubation de billes magnétiques24Heures,ELISADétection dans le surnageantInterféron gammaEt,IL-4Et,IL-13etIL-17Niveau; Évaluation histopathologique semi - Quantitative aveugle d'échantillons de peau, en utilisant0 - 3Système divisé (0Pour la normalité,1Pour légère,2Est modérée,3Lourd).

Conclusion de l'expérimentation

Expérimentations in vitro,LSAmélioration du traitementDC2.4Sécrétion cellulaireIL-10etTNFαEt peut réduire la stimulationHachanProduction de cellulesIL-8etLe tarcPrésente une dépendance à la dose.

DansADDans les paramètres de traitement du modèle de souris,LSBien que nonClairementModification des signes cliniques, de l'épaisseur de la peau etTEWL, mais améliore les manifestations histologiques telles que l'hyperplasie du Stratum Corneum et les croûtes épidermiques, tout en réduisant les ganglions lymphatiques locauxIgEPositifC. BLe nombre de cellules etIL-4Niveau.

Le traitement préventif est plus efficaceClairement,LSPeut réduireADSignes cliniques et degré de lésions histologiques chez la souris, réduction des effets dans les ganglions lymphatiquesTLe nombre de cellules etIL-13Niveau.

Dans l'ensemble, cultures microbiennes mixtes de Lactobacillus paracasei, Pichia membranosum et Saccharomyces cerevisiae (LS), possède une activité immunomodulatrice et anti - inflammatoire, contreADL'effet préventif est supérieur à l'effet thérapeutique, pourADUne intervention précoce de régulation locale du microbiome offre des stratégies potentielles.