Comment valider un compteur de cellules automatique: avantages de l'utilisation d'une lame de validation

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1 Introduction

Les compteurs de cellules automatiques sont populaires pour leur capacité à fournir des résultats de comptage cellulaire rapides et précis. Malgré ces avantages, il est essentiel de vérifier sa précision pour garantir des résultats fiables de comptage cellulaire. Les Microsphères sont souvent utilisées pour valider des dispositifs tels que les cytomètres en flux et les compteurs de cellules automatiques.MaisDivers problèmes liés à l'utilisation de microsphères ont motivé la recherche et le développement de lames de vérification de cytomètres pour la vérificationPoint àLUNA ™ Compteur de cellulesSérie.

Dans cet article, nous explorerons les critères de comptage cellulaire, ainsi que l'utilisation d'un compteur de cellules pour valider les diapositivesPoint àLUNA ™ Avantages de la série de compteurs de cellules.

2 Norme internationale de comptage cellulaire

La norme ISO 20391 a été élaborée pour fournir des conseils sur le comptage précis des cellules et assurer la fiabilité des résultats du comptage cellulaire. La norme décrit un protocole pour vérifier la qualité des mesures de comptage cellulaire par des expériences de dilution en série qui peuvent être utilisées lorsqu'il n'y a pas de matériau de référence. Cependant, ce processus peut être long et complexe, et des calculs complexes sont nécessaires pour déterminer les coefficients de décision et de proportionnalité.

Pour surmonter ce défi, il est recommandé d'utiliser des matériaux de référence pour assurer la traçabilité des mesures, faciliter les comparaisons et valider le processus de mesure. Une méthode efficace consiste à comparer les résultats d'analyse moyens avec les valeurs de référence obtenues à partir de matériaux de référence éprouvés, de sorte qu'aucun calcul complexe n'est nécessaire. Néanmoins, le choix des matériaux de référence appropriés reste difficile.

3 défis liés à l'utilisation de microsphères validées comme matériau de référence

Les Microsphères de validation, telles que les microsphères du National Institute of Standards and Technology (NIST), sont souvent utilisées comme matériau de référence dans diverses méthodes analytiques impliquant la taille et le comptage des particules. Ces microsphères ont des tailles et des concentrations connues et sont souvent utilisées comme étalons d'étalonnage pour la cytométrie de flux, l'Examen microscopique et d'autres techniques similaires. Mais les microsphères NIST n'ont pas de forme fluorescente et ne conviennent pas pour tester la viabilité cellulaire.

Bien que les microsphères fluorescentes commerciales puissent être utilisées comme alternative, des erreurs lors du pipetage, ainsi que l'évaporation pendant le stockage à long terme, peuvent affecter leur précision, ce qui nécessite une manipulation prudente et des tests répétés. Il n'existe donc actuellement aucun matériel de référence commercial disponible pour l'évaluation de la viabilité cellulaire.

Les utilisateurs qui choisissent de préparer eux - mêmes le matériau de référence en interne devront compter sur un comptage manuel relativement imprécis et nécessitant un grand nombre d'échantillons. Ou la cytométrie en flux peut être utilisée, bien que l'obtention de résultats de comptage puisse être difficile, une méthode moins pratique pour l'utilisateur. Il est donc nécessaire de trouver une méthode alternative d'évaluation de la viabilité cellulaire.

4 Utilisation de la lame de vérification comme matériau de référence

L'utilisation de matériaux de référence avec stabilité et cohérence est essentielle pour garantir des résultats précis du comptage cellulaire. Une option qui peut fournir ce niveau de contrôle de la qualité est l'utilisation de diapositives de vérification. Ces lames contiennent des motifs pré - échantillonnés ou des microsphères fluorescentes pré - fixées, surmontées d'un nombre connu d'objets, éliminant des problèmes tels que les variations de concentration dues au chargement de l'échantillon, l'évaporation lors du stockage ou les inégalités de distribution.

De plus, la lame de validation permet de vérifier le nombre total de cellules et la viabilité cellulaire à l'aide d'un champ clair et d'une optique fluorescente du cytomètre. La vérification croisée avec d'autres appareils est également simple et sa stabilité garantit que les valeurs mesurées restent constantes même après un stockage prolongé ou une utilisation répétée. En utilisant des diapositives de validation, les chercheurs peuvent économiser du temps et des ressources qui auraient été autrement utilisés pour mener des expériences supplémentaires pour assurer la précision.

(A) Diapositive de vérification du cytomètre – Clearfield type II (b) diapositive de vérification du cytomètre – fluorescent

5 Comment vérifier la précision de l'évaluation de la lame à l'aide d'un cytomètre

Le Protocole de diapositive de validation du cytomètre simplifie et améliore le processus de vérification de la précision du cytomètre en fournissant une alternative simple et efficace aux microsphères. Cette méthode permet de gagner du temps et offre un moyen facile de vérifier la précision des résultats de comptage cellulaire.

Pour vérifier le Protocole de la lame à l'aide d'un cytomètre, suivez ces étapes simples:

1) Vérifiez le cytomètre pour vérifier la concentration cellulaire et les valeurs de viabilité cellulaire sur l'étiquette de la lame.

2) Insérez la lame dans le dispositif de comptage cellulaire.

3) Utilisez le schéma "iqoq" pour commencer à compter.

4) La concentration cellulaire totale et les valeurs de viabilité cellulaire sont enregistrées.

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