Expérience ELISA: le problème de la courbe ELISA

Il y a eu des problèmes avec les courbes dans les expériences ELISA, la plupart du temps avec des normes, des opérations ou de l'équipement qui n'étaient pas en place. Conclusion principale: les problèmes de marquage se posent généralement sur la manipulation standard, les opérations d'échantillonnage ou les conditions d'incubation, et un examen ciblé de ces liens peut être rapidement localisé.

I. causes courantes d'une mauvaise courbe standard

Dissolution et dilution incorrectes des standards

La poudre standard n'est pas suffisamment dissoute ou n'est pas mélangée lorsqu'elle est diluée, ce qui entraîne une concentration insuffisante.

Recommandation: utiliser la dilution spécifiée selon les instructions, centrifuger brièvement après dissolution, diluer avec une nouvelle tête de pistolet lorsque le gradient est dilué, mélanger par soufflage ou vortex.

Opération d'addition imprécise

La pipette n'est pas calibrée, ou la vitesse d'échantillonnage, l'angle ne sont pas cohérents, le volume entre les pores varie considérablement.

Recommandation: calibrez régulièrement la pipette, verticalement et en douceur lors de l'échantillonnage, appliquez la tête du pistolet au niveau du liquide, mais sans toucher le fond, évitez les bulles d'air.

Les conditions d'incubation ne sont pas constantes

Aucun film de plaque d'étanchéité ou le couvercle n'est pas rigide, entraînant un effet de bord; Le temps de température est instable.

Recommandation: avec une membrane de scellement de haute qualité, la plaque d'enzyme met l'incubateur thermostatique pour éviter l'incubation naturelle.

II. Autres problèmes courants de courbe et contre - mesures

Globalement faible

Causes possibles: réactif expiré, standard non dissous, non détecté immédiatement après la fin du liquide, mélange de réactifs.

Recommandation: conserver les réactifs selon les instructions, centrifuger les étalons avant de les dissoudre, mélanger au repos après avoir ajouté la dilution, détecter immédiatement après la fin du liquide.

Aucun signal

Causes possibles: réactif périmé, contamination par l'enzyme HRP, erreur de manipulation (par exemple, mauvais ordre d'addition).

Recommandation: Vérifiez l'étiquette des réactifs, dosez Le tampon avec de l'eau fraîchement distillée et équilibrez la température ambiante des réactifs pendant 30 minutes.

Globalement élevé

Causes possibles: plage de densité optique trop large de l'étalon enzymatique, concentration élevée du liquide de travail, temps d'incubation long / température élevée.

Recommandation: la densité optique est comprise entre 0 et 3,5, le liquide de travail est maintenant utilisé, la température de la boîte d'incubation est contrôlée par 37 ± 0,5 ℃.

Iii. Recommandations d'optimisation

Traitement standard: centrifuger avant dissolution, mélanger au repos après avoir ajouté la dilution.

Opération de dosage: calibrez la pipette, le dosage est lisse verticalement et évite les bulles d'air.

Conditions d'incubation: scellé avec une membrane de plaque scellée, la plaque d'enzyme est placée dans un incubateur thermostatique.

Inspection de l'équipement: calibrez régulièrement la pipette, le marqueur enzymatique définit la plage de densité optique correcte.

Remarque: ci - dessus est pour référence seulement, ce produit est pour l'usage scientifique seulement, pas comme données réelles, l'expérience doit suivre strictement les instructions ou consulter l'enseignant technique.

Kits ELISA Tianjin Hongsheng a toujours considéré le contrôle de la qualité comme la vie de l'entreprise et a poursuivi l'amélioration continue de la compétitivité de l'entreprise. La société a toujours adhéré dans ses opérations: respecter les lois et la loi, être strict avec lui - même, kanren attendre, oser assumer l'esprit d'entreprise comme norme, maintenir et élargir le marché avec une qualité excessive et un excellent service, afin de répondre au maximum aux besoins des clients. Gagnant - gagnant avec nos clients est notre objectif de développement. Ben sen! Un partenaire en qui vous avez confiance. Nous aimerions coopérer sincèrement avec vous pour créer un avenir merveilleux ensemble. Kits natifs