Comment assurer la répétabilité des expériences ELISA?

I. traitement standard et spécifications d'échantillonnage

Traitement des produits standard: les produits standard lyophilisés doivent être redissous avec une dilution assortie, dilution Gradient après mélange au vortex (par exemple, 640 pg / ML à 0 pg / ML) pour éviter la congélation et la dégel répétées.

Spécifications supplémentaires:

À l'aide d'une pipette calibrée, l'application de la tête d'aspiration est injectée lentement à 45 ° lors de l'échantillonnage, en évitant les bulles d'air et le liquide accrochant la paroi.

Contrôle de la vitesse de remplissage (en 5 minutes), erreur inter - pores < 5%.

II. Contrôle de l'incubation et optimisation du lavage

Contrôle de l'incubation: incubation thermostatique à 37 ℃, scellement de la membrane de la plaque pour empêcher l'évaporation, mélangeur d'aide de concussion.

Optimisation du lavage:

Le liquide de lavage est maintenant utilisé (dilution 1: 20), laisser reposer 30 secondes après chaque puits rempli et répéter 5 fois.

Évitez les résidus lors du séchage, les trous des bords doivent être inspectés de manière ciblée.

Iii. Renforcement fermé et équilibre réactif

Renforcement de la fermeture: 1% de BSA ou de gélatine bloquée pendant 1,5 heure, réduisant la liaison non spécifique.

Équilibre des réactifs:

La température ambiante du kit est équilibrée pendant 15 à 30 minutes et le substrat est conservé à l'abri de la lumière.

Le sac scellé après ouverture de la plaque de marquage enzymatique est conservé pour éviter l'humidité.

Iv. Traitement des échantillons et étalonnage des pipettes

Traitement des échantillons:

Fractionnement des échantillons de sérum après centrifugation pour éviter la congélation et la dégel répétées; Les échantillons à forte concentration doivent être pré - dilués.

Les échantillons de sang lytique ou lipidique doivent être traités par Ultrafiltration.

Étalonnage de la pipette: calibrez la pipette tous les mois et vérifiez l'étanchéité avant de procéder à l'échantillonnage.

V. enregistrement de l'incubation et gestion des lots

Enregistrement de l'incubation: utilisez une minuterie pour contrôler le temps d'incubation et éviter les erreurs humaines.

批次管理‌：

Le mélange est interdit pour les différents lots de réactifs, en marquant la date d'ouverture du flacon.

Les échantillons de contrôle de la qualité (tels que les contrôles positifs) doivent être définis par plaque.

Les mesures ci - dessus peuvent améliorer considérablement la répétabilité des expériences ELISA, garantissant des résultats stables et fiables.

Remarque: ce produit est destiné à un usage scientifique uniquement et ne constitue pas une base expérimentale. Pour les opérations spécifiques, veuillez respecter les instructions réelles du kit.

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