Kit de détection ELISA du facteur de croissance épidermique porcin (EGF) fiche technique

BS - 4568 Kit ELISA pour facteur de croissance épidermique porcin (EGF)

I. Aperçu du produit

Ce kit utilise la technologie d'immunoadsorption enzymatique à double anticorps sandwich pour la détection quantitative de la teneur en facteur de croissance épidermique (EGF) dans le sérum, le plasma, les homogénats de tissus et les surnageants de culture cellulaire de porcs. Les produits sont destinés uniquement à la recherche scientifique et sont adaptés à la régulation de la croissance des porcs uniquement, à la recherche de modèles de maladies et à d'autres domaines.

II. Principe de détection

Package d'anticorps en phase solide: un anticorps monoclonal anti - EGF porcin est pré - packagé sur une microplaque pour former un vecteur en phase solide.

Réaction antigène - anticorps: l'EGF dans l'échantillon se lie à l'anticorps en phase solide, puis est ajouté à un anti - biotine marqué pour former un complexe sandwich

Rendu chromatique enzymatique: ajout de Streptavidine marquée HRP, rendu chromatique catalytique du substrat TMB, nuances de couleur positivement corrélées à la concentration d'EGF dans l'échantillon

Analyse quantitative: détermination de l'Absorbance à une longueur d'onde de 450 nm, calcul de la concentration par courbe standard

Iii. Composition du kit

Spécifications des composants conditions de conservation

Pré - emballage scellé par microplaque 96 puits / plaque 2 - 8 ℃

Standard (lyophilisé) 6 tubes - 20 ℃

Enzyme Tag II anti 6ml 2 - 8 ℃ protégé de la lumière

Agent de rendu des couleurs A / B liquide 6ml chacun 2 - 8 ℃ protégé de la lumière

Solution de terminaison 6 ml température ambiante

20 × tampon de lavage 20 ml température ambiante

Dilution de l'échantillon 6 ml 2 - 8 ℃

Instructions 1 exemplaire -

Iv. Traitement des échantillons

Exigences de collecte:

Sérum / plasma: Anticoagulation par EDTA, centrifugation après décantation du sérum au repos (3000 RPM × 15 min)

Homogénat tissulaire: broyer en ajoutant de la saumure physiologique selon 1: 9, centrifuger pour enlever le nettoyage

Éclaircissement cellulaire: centrifugation à 1000rpm pendant 10 minutes pour éliminer les impuretés

Conditions de conservation:

Court terme: 2 - 8 ℃ (≤ 3 jours)

Long terme: - 20 ℃ (éviter le gel - dégel répété)

V. Étapes opérationnelles

Dilution Standard:

Formulation de 480 pg / ml de solution brute avec une dilution standard diluée à 0 pg / ML selon un gradient de 2 fois

Séquence de dilution: 480→240→120→60→30→0 pg / ml

Réaction d'addition:

Ajoutez des étalons / échantillons 50 μl par puits, aucun trou vide

Incuber à 37 ° C pendant 30 minutes, laver la plaque 5 fois

Réaction de liaison enzymatique:

Ajouter l'enzyme étalon - anti 50 μl, incuber à 37 ° C pendant 30 minutes

Ajouter le liquide de rendu des couleurs TMB après le lavage de la plaque et réagir à l'abri de la lumière pendant 10 minutes

Fin de la détermination:

Ajout du liquide de terminaison 50 µl, détermination de l'Absorbance à 450 nm en 30 minutes

Vi. Calcul des résultats

La courbe standard est tracée en abscisse avec la concentration du standard (pg / ML) et en ordonnée avec la valeur OD

Concentration de l'échantillon = valeur ajustée de la courbe standard × multiple de dilution de l'échantillon (5 dilutions recommandées)

Vii. Paramètres de performance

Paramètres des indicateurs

Plage de détection 7,8 - 500 pg / ml

Sensibilité 2,51 pg / ml

批内精密度 CV <6,6%

Précision inter - lots CV < 7,9%

Taux de récupération 91 - 109%

Remarque: ce qui précède est à titre indicatif seulement et n'est pas considéré comme des données réelles, l'expérience doit suivre strictement les instructions ou consulter l'enseignant technique. Kits ELISA

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